葡萄球菌，微球菌及相关菌属鉴定试剂盒（比色法）说明书
【产品名称】
通用名称：葡萄球菌，微球菌及相关菌属鉴定试剂盒（比色法）
英文名称：API Staph
【包装规格】
25 测试/盒
【预期用途】
该产品在医学临床上用于测定可导致外伤、血liugan染等的葡萄球菌属、微球菌属和库克菌属的鉴定，临床常
见样品来源有血、脓、拭子。
【检验原理】
API Staph 试剂条由装有脱水底物的 20 个微型管构成。将细菌混悬液接种到微型管中，混悬液是在重组形成试
验的 API Staph 培养基中制备的。在培养过程中，代谢产生颜色变化，此变化可为自发或通过加入试剂显示。
依照读数表读取反应，通过参考分析谱索引或使用鉴定软件得到鉴定。
【储存条件及有效期】
试剂条和培养基在包装上注明的有效期内应贮藏在 2～8℃下，有效期 12 个月。
【适用仪器】
-
McFarland 标准比浊管（Ref.70 900）
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API Staph 数值分析索引（Ref.20 590）或 apiweb TM 鉴定软件(产品号. 40 011)
【样本要求】
API Staph不直接用于临床或其他标本（例如血、脓、拭子等）。
按照标准微生物学技术，须先在适合的培养基上分离要鉴定的微生物。
【检验方法】
试条的准备
? 准备一个培养盒（盘和盖子），向盘的蜂窝状孔中倒入约5mL蒸馏水或去离子水【或任何不含添加剂或可能
释放气体（如二氧化碳等）的化学物的水】，创造一种潮湿的环境。
? 将菌株参考号记录在托盘的长条上。（由于在操作过程中可能放错，因此不要将参考号记录在盖子上。）
? 从各个包装中取出试剂条。
? 将试剂条放入培养盒中。
制备接种物
? 36°C ± 2°C下，将细菌置于哥伦比亚血液琼脂（P琼脂）上进行传代培养18～24小时。
? 确认该菌株属于微球菌科（形态，革兰染色，过氧化氢酶等），并确认培养物是纯净的。
? 按照警告和注意事项段落所示，打开API Staph培养基安瓿。
? 配制浊度等于0.5 McFarland的均匀细菌悬液。建议使用早期培养物（18～24小时）。
此混悬液在配制后必须立即使用。
试剂条的接种
? 使用移液管或PSIpette，将接种的API Staph培养基移入微型管，只填充试管部分，杯形器不填充（微型管留
少许不充满）。将试剂条稍前倾，将吸管或滴管的顶部靠在杯的侧面，以避免管的底部形成气泡。
? 用矿物油填充杯形器形成凸出弯月面，以保证ADH和URE实验的无氧环境。
? 关上培养箱；
? 在 36℃±2℃下培养 18～24 小时。
读取试剂条
? 保温培养期过后，通过加入下列试剂各一滴，然后参考读数表读取所有反应：
- VP试验：VP 1和VP 2试剂。
等待10分钟。紫粉色表示阳性反应。如果10分钟后显浅粉色或淡粉色，应将反应视为阴性。
- NIT试验：NIT 1和NIT 2试剂。
等待10分钟。红色表示阳性反应。
- PAL检测：ZYM A和ZYM B试剂(*)。
等待10分钟。紫色表示阳性反应。如果10分钟后显粉米色或很浅的紫色，应将反应视为阴性。葡萄球菌，微球菌及相关菌属鉴定试剂盒（比色法） 版本号 07468M-CN-2017/03
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(*) 建议在 使用前控制每个ZYM B安瓿。为了消除任何缺陷试剂，建议按照质控章节所述应用ATCC®
700404™ 菌株进行质量控制检测。
? 将结果记录在结果表中。
溶葡萄球菌酶耐药试验
按以下所示步骤或依照制造商的建议，测定P琼脂上对溶葡萄球菌酶的耐药性。
进行试验时，在P琼脂平板的表面注满细菌混悬液（大约107
个微生物/mL）。
在36°C ± 2°C下干燥10-20分钟。
在琼脂表面上滴一滴溶葡糖球菌酶溶液（200 μg/mL）。
35～37°C下孵育18～24小时。
细菌培养物的全部或部分溶解说明了对该酶的易感性。
这个试验组成试剂条的第 21 个试验。如果检测出对溶葡萄球菌酶的耐药性，那么认为结果是阳性的。
【阳性判断值或者参考区间】
请参考本说明书后的鉴定表，表中列出了各种生化反应预期结果范围。
【检验结果的解释】
采用数字谱获得鉴定。
? 测定数字谱：
在结果表上，将试验分成3组，每组标记为编号1、2或4。在每组内加阳性反应相应的数字，得到一个7位数；
? 鉴定：
这采用数据库（V 4.1）进行
*用分析谱索引：
- 查找图谱列表中的数字谱。
* 采用apiwebTM鉴定软件：
-通过键盘手动输入7位数的数字谱。
